iPS细胞培养利器—Laminin-511 E8

干细胞培养为什么需要胞外基质？

胞外基质在干细胞培养中至关重要，因为它提供了必要的物理支持和生物化学信号，促进细胞粘附、增殖、维持多能性、引导分化，并模拟体内环境，从而确保干细胞的行为和功能与其在自然状态下相似。

干细胞培养中常见的胞外基质有哪些呢？

1、层粘连蛋白（Laminin）：层粘连蛋白是一种十字形三聚体蛋白，含有α、β和γ链，是基底膜的主要成分。层粘连蛋白具有多种细胞结合基序，可以与细胞整合素和蛋白聚糖结合，激活信号通路，从而调节多能干细胞的自我更新、分化和多能性。特别地，Laminin-521和Laminin-511是两种重要的亚型，它们在维持多能干细胞增殖和特异性分化方面具有潜能。

2、基底膜提取物（Basement Membrane Extract, BME）：如Stem Cell Qualified ECM Gel Matrix (CC131)，是从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)肿瘤中纯化的可溶性基底膜提取物，含有层粘连蛋白、胶原IV、纤连蛋白、硫酸肝素等ECM成分。

3、纤连蛋白（Fibronectin）：纤连蛋白是一种大分子量细胞外糖蛋白，具有多个结合域，能够与ECM蛋白和细胞粘附分子结合，调控不同的信号通路，参与细胞迁移、黏附、增殖等生物学过程。

4、玻连蛋白（Vitronectin）：玻连蛋白是一种小分子量糖蛋白，能够促进细胞黏附、伸展和迁移。它与整合素αvβ5和αvβ1相互作用，维持干细胞的多能性、正常核型和体外分化的能力。

5、胶原（Collagen）：胶原蛋白是细胞外基质的主要成分之一，对细胞的黏附、功能和组织稳定至关重要。

同立海源iPS培养细胞外基质产品——重组人Laminin-511 E8蛋白

Laminin-511 E8，通常简称为LN511-E8，是一种特定形式的层粘连蛋白，为细胞提供结构支持并促使细胞彼此粘附。LN511-E8可以应用于诱导多功能干细胞（iPSC）的培养，它提供了一个支持性的基质，使得iPSCs能够粘附在培养皿表面上并进行增殖。这种基质能够通过与细胞表面受体的相互作用，促进细胞的黏附和扩增。Laminin511-E8无需板前涂层，仅需要添加到培养基并可以在无进料的情况下培养iPSC，节省了细胞培养时间。此外，LN511-E8支持细胞生长和定向分化，是类器官研究中的优质原料。研究表明，相比较全长型Laminin、Vitronectin、Matrigel，Laminin-511 E8赋予了细胞更强的贴壁特性。

图1：hESCs在各种细胞外基质上的剂量-反应粘附曲线。重组人Laminin-511 E8蛋白在1.5μg/cm²显示出比其他基质更高的细胞粘附效率。

图2：在还原条件下，重组人Laminin-511 E8蛋白的SDS-PAGE纯度大于90%。

图3：通过重组人Laminin-511 E8蛋白促进hiPS细胞黏附能力测定，这种效应 ED₅₀≤5μg/mL。

图4：添加重组人Laminin-511 E8蛋白后，IPS细胞从25代稳定传代至27代且细胞状态良好。